RESUMO A tuberculose bovina é uma zoonose de distribuição mundial cujos testes mais utilizados para o diagnóstico são as tuberculinizações intradérmicas, simples e compartivas. Contudo, testes sorológicos podem constituir diagnósticos auxiliares. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho diagnóstico do teste ELISA Mycobacterium Bovis Antibody Test Kit IDEXX ® em rebanhos bovinos infectados, que se encontravam em diferentes estágios de controle da doença. Cento e vinte animais de dois rebanhos leiteiros provenientes do estado de Minas Geais-Brasil foram submetidos ao ELISA e à tuberculinização cervical compartiva (TCC). Avaliou-se o desempenho dos testes por meio de modelos Bayesianos de classe latente e a concordância entre os eles, por meio de estatística frequentista. Uma maior sensibilidade do teste foi observada no rebanho previamente tuberculinizado. Em ambos os rebanhos o TCC foi mais sensível que o ELISA. Especificidade acima de 95% foi encontrada em ambos os rebanhos. Foram observadas baixa concordância ou mesmo discordância entre os testes. De acordo com os resultados obtidos, o teste ELISA-IDEXX não deve ser utilizado em substituição à TCC, tampouco devem ser associados em série. Houve aumento da sensibilidade quando os testes foram associados em paralelo no rebanho que já se encontrava em processo de saneamento.

ABSTRACT Bovine tuberculosis is a worldwide spread zoonotic disease. Intradermal tuberculinizations are the most used diagnostic tests in the world. Serological tests can be an ancillary diagnosis for bovine tuberculosis. The objective of this study was to evaluate the diagnostic performance of the ELISA Mycobacterium Bovis Antibody Test Kit IDEXX ™ in infected herds, which were in different disease control stages. One hundred and twenty animals from two dairy herds of Minas Gerais state, Brazil, were subjected to the ELISA serological test and the comparative cervical tuberculin test (CCT). Diagnostic test parameters were estimated using Bayesian latent class models and concordance between tests estimated by the frequentist approach. The ELISA test presented lower sensitivity than CCT in both herds. Its sensitivity was higher in the herd in sanitation process. Specificity estimates were above 95% in both herds. Kappa index indicated low concordance or even disagreement between tests. According to the results, the ELISA IDEXX should not be used as substitution for CCT. The tests must not be associated in series. Parallel association increased diagnostic sensitivity in the herd which was in the process of sanitation.

RESUMO O vírus da imunodeficiência bovina é o agente causador da imunodeficiência viral bovina que é conhecido por infectar bovinos em todo o mundo. Como em outras infecções por retrovírus, os hospedeiros desenvolvem uma infecção de longo prazo e a maioria dos animais infectados permanece assintomática. O objetivo deste estudo foi detectar DNA proviral BIV em amostras de sangue de bovinos e estimar a ocorrência de infecção no estado de Minas Gerais, Brasil. Amostras de sangue de 391 bovinos foram coletadas de duas regiões do estado, Zona da Mata e Central. O DNA proviral foi detectado por reação em cadeia da polimerase semi-nested (SN-PCR). Os resultados de SN-PCR indicaram uma ocorrência de BIV de 12,5% no estado. Os produtos amplificados foram confirmados como BIV por sequenciamento e a similaridade da sequência de nucleotídeos com a estirpe de referência (R-29) foi de 99%. Este é o primeiro estudo que relata a presença do BIV em Minas Gerais, Brasil. Os resultados indicam a necessidade de realizar um estudo detalhado sobre a prevalência da infecção por BIV no Brasil.

Abstract Fiber Bragg gratings (FBGs) offer new possibilities to monitor accurately the rotor temperature. Dozens of sensors can be mounted in series in a single fiber and used to measure the temperature in several points of the rotor winding. Such sensors installed directly on the rotor winding surface are thermally isolated from the cooling air by a silicone layer. Because of the temperature gradient in this structure, the sensor is exposed to thermo-mechanical stresses and therefore can be deformed. Since the FBG probes are sensitive to both temperature and strain, the knowledge of each effect separately is necessary to ensure that the temperature readings are not affected by strain. Experimental results obtained in rotor winding mockup tests with thermistors and FBG sensors show that the temperature readings by the FBG are 4.5°C above the temperature defined by the thermistors which were used as references. Multi-physics simulations were carried out to calculate the strain and temperature in the FBG assembly. The theoretical and experimental results are in a good agreement.

Objetivou-se avaliar os efeitos da umidade relativa do ar nas incubadoras (URI) e da idade da matriz leve sobre a eclodibilidade, qualidade dos pintos recém-eclodidos e o desempenho da progênie. Foram incubados 10.840 ovos, sendo os tratamentos definidos pela idade das matrizes Lohmann LSL(r) (26, 41 e 56 semanas) e pelos níveis de URI (48, 56 e 64%). Após a incubação, 1.620 pintos fêmeas foram alojados em galpão experimental convencional, de acordo com os tratamentos, até as 12 semanas de idade. Para a avaliação de eclodibilidade sobre ovos férteis e fêmeas refugos, o delineamento experimental foi em blocos ao acaso no arranjo em parcelas subdivididas. A parcela foi a URI (três níveis) e a subparcela foi a idade da matriz (três idades). Os blocos foram constituídos pelos andares dos carrinhos de incubação, em que cada andar continha uma repetição de cada idade da matriz. Os nove tratamentos foram constituídos por 14 repetições cada. As repetições foram bandejas de incubação, constituindo 1.204 ovos por tratamento. Para a avaliação do desempenho das frangas, o delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, constituído por um esquema fatorial 3x3 (três níveis de URI e três idades), com seis repetições de 30 aves em cada tratamento. A eclodibilidade sobre ovos férteis foi maior (P<0,05) com a utilização de 56% de umidade relativa do ar durante a incubação, independentemente da idade da matriz; e ovos de matrizes mais velhas (56 semanas) apresentaram eclodibilidade menor (P<0,05), independentemente do nível de umidade relativa do ar no interior das incubadoras. Não foram constatados efeitos da idade da matriz e URI sobre o percentual de pintos refugos. A URI ou a idade da matriz leve não afetam o desempenho da progênie.

The aim of this study was to evaluate the effects of relative humidity in incubators (RHI) and breeder hen age on hatchability, hatchling quality and performance of progeny. 10,840 eggs were incubated, and the treatments were defined by the Lohmann LSL(r) breeder age (26, 41 and 56 weeks) and the levels of RHI (48, 56 and 64%). After incubation, 1,620 female chicks were raised in a conventional experimental shed, according to the treatments, until 12 weeks of age. To assess the hatchability of fertile eggs and unviable female chicks, the experimental design was randomized blocks in split plots design. The plot factor was the RHI and the subplot was the age of the breeder hens. The blocks were made by the floors of the incubation carriages, where each floor contained a repetition of each breeder age. The nine treatments consisted of 14 repetitions each. The repetitions were trays of incubation, with 1,204 eggs per treatment. To evaluate the performance of the progeny, the experimental design was completely randomized, consisting of a 3x3 factorial scheme with six replicates of 30 birds in each treatment. Hatchability of fertile eggs was higher (P<0.05) with the use of 56% relative humidity during incubation, regardless of breeder age, and the eggs from the oldest breeder hens (56 weeks) had lower hatchability (P<0.05), regardless of the level of relative humidity inside the incubator. No effects of breeder age and RHI on the percentage of unviable chicks were observed. The RHI or the age of the breeder hen does not affect the performance of progeny.

Foram analisados os níveis de pCO2, pO2, pH e HCO3 - de embriões e pintos de corte provenientes de matrizes novas e velhas, nos momentos anteriores à bicagem interna e externa da casca e ao nascimento, submetidos a diferentes períodos de transferência para as condições ambientais dos nascedouros. Os tratamentos foram definidos pela idade da matriz (33 e 63 semanas) e pela transferência para o nascedouro (aos 15, 17 e 19 dias). O delineamento experimental foi em parcelas subdivididas, sendo a parcela os três momentos de transferência e a subparcela as duas idades das matrizes. Foram utilizadas seis repetições para cada tratamento, e o embrião ou o pinto foi considerado uma repetição. Os dados normais e homogêneos foram submetidos às análises de variância, e as médias comparadas pelos testes F, de Tukey e SNK. Embriões cujos ovos foram transferidos aos 15 dias para o nascedouro apresentaram melhor equilíbrio ácido-básico durante as fases pré-natal e perinatal. Durante o último terço da incubação, independentemente das diferentes condições ambientais às quais os embriões são submetidos e da idade da matriz, há capacidade de resposta fisiológica que permite uma estabilidade no equilíbrio ácido-básico dos pintos após a eclosão.

We analyzed the levels of pCO2, pO2, pH and HCO3 - in embryos and chicks from young and older breeders, in the moments before internal pipping, external pipping and at hatch and submitted to different periods in the environmental conditions of hatchers. The treatments were defined by breeder age (33 and 63 weeks) and transfer to the hatcher (at 15, 17 and 19 days). The experimental design was split plots with three periods in the hatcher and the plots were the two breeder ages. We used six replicates per treatment and the embryo or chick was considered a repetition. The normal data forms were submitted to analysis of variance and means were compared by F, Tukey and SNK tests. Embryos transferred at 15 days to the hatcher had better acid-base balance during the pre-and perinatal phases. During the last third of incubation, regardless of the different environmental conditions which the embryos are subjected and breeder age, there is physiological responsiveness that allows for stability in acid-base balance of the chicks after hatching.

Foram avaliados os efeitos do momento de transferência dos ovos da incubadora para o nascedouro e da idade da matriz pesada sobre o rendimento de incubação. Os tratamentos foram definidos pela idade das matrizes Cobb®, sendo considerados ovos de matrizes novas (33 semanas) e ovos de matrizes velhas (63 semanas), e pelos momentos de transferência da câmara de incubação para os nascedouros (aos 15, 17 e 19 dias). O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso em parcelas subdivididas, sendo o fator da parcela os três momentos das transferências e as subparcelas as duas idades das matrizes, com 18 repetições por tratamento. A bandeja com 96 ovos foi considerada a repetição, totalizando 1.728 ovos para cada tratamento. Ovos de matrizes velhas são mais pesados, perdem mais peso durante a incubação e têm percentual de fertilidade menor (P<0,05), qualquer que seja o momento de transferência dos ovos. Independentemente da idade das matrizes, a transferência dos ovos da incubadora para o nascedouro aos 15, 17 ou 19 dias de incubação não interfere na mortalidade embrionária, eclodibilidade e peso dos pintos ao nascimento. É possível adaptar o manejo de transferência à necessidade logística do incubatório ou reduzir o período dos ovos na máquina de incubação para aumentar o fluxo de produção, sem prejuízo ao rendimento de incubação.

We evaluated the effects of the moment of egg transfer to the hatcher and broiler breeder age on the incubation yield. The treatments were defined by Cobb ® broiler breeder age, separating young breeders (33 weeks old) from older breeders (63 weeks old) and the moment of transfer from incubation chamber to the hatcher (at 15, 17 and 19 days). The experimental design was completely randomized split plot. The plots factor was the three times of transfers and the subplots the two breeder ages, with 18 replicates per treatment. A tray of 96 eggs was considered replay, totaling 1728 eggs for each treatment. Eggs from older breeders are heavier, lose more weight during incubation and fertility rate is lower (p<0.05), regardless of the moments of eggs transfer. Regardless of the breeder age, the transfer of eggs from the incubator to the hatcher at 15, 17 or 19 days of incubation does not interfere in embryonic mortality, hatchability and chick weight at hatch. You can adapt the transfer management to the logistic needs of the hatchery or reduce the period of egg incubation in the machine to increase the flow of production with no losses in incubation yield.

O presente estudo teve como objetivo promover o levantamento de índices zootécnicos para calcular e comparar a eficiência reprodutiva de rebanhos bovinos leiteiros por diferentes métodos. O intervalo de partos dos rebanhos estudados apresentou uma variação de 13,3 a 15,2 meses por meio dos diferentes métodos utilizados para sua obtenção, não se observando diferença significativa (P>0,05) entre eles. As avaliações pelos métodos de Johnson et al. (1964) e Butendieck et al. (1972) mostraram, respectivamente, eficiência reprodutiva de 79,5 e 77,8%. Embora considerados métodos mais eficientes que o de Willcox et al. (1957), cuja média encontrada para os mesmos rebanhos foi de 90,2%, não se observou diferença significativa entre os resultados obtidos pelos três métodos.

The study aimed to promote the lifting of indexes to calculate and compare the reproductive efficiency of dairy cattle herds by different methods. The parturition interval studied showed a variation from 13.3 to 15.2 months by means of different methods for obtaining it are not observing a significant difference (P> 0.05) between them. Evaluations by the methods of Johnson et al (1964) and Butendieck et al. (1972) showed, respectively, reproductive efficiency of 79.5 and 77.8%. Although regarded as the most efficient methods of Willcox et al. (1957), whose average found in the same herd was 90.2%, there was no significant difference between the results obtained by three methods.

A redução da produção de leite em bovinos é um dos aspectos majoritários na composição total do valor de impacto econômico provocado por R. (B.) microplus. Portanto, o objetivo deste estudo foi estimar a perda decorrente da carga parasitária, observada em uma propriedade produtora de leite na região central de Minas Gerais. Para tal, foram consideradas 30 contagens de carrapatos, distribuídas de maneira uniforme durante o período de um ano, em um rebanho bovino com 74 vacas de composição racial 3/4 Holandês x Zebu, mantidas sob sistema de produção intensivo em pastoreio. A partir dos dados observados, foi possível estimar que 937.968 teleóginas completaram o repasto sanguíneo e foram responsáveis pela redução de 6.678 litros de leite durante o período avaliado. Esse valor corresponde a uma redução de 2,7% da produção, média de 90,24 litros por vaca em lactação.

The aims of this study were to standard and optimize a qPCR protocol with FAM-BHQ1 probe, and to compare its sensitivity against TaqMan qPCR and PCR methods to diagnose shrimp WSD. The FAM-BHQ1 qPCR presented higher clinical sensitivity and showed to be a robust alternative to detect WSSV in clinical samples.

O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma PCR em tempo real (qPCR) para o diagnóstico rápido e sensível da doença de Aujeszky. Os iniciadores amplificaram um fragmento de 123 pares de base do gene codificante da glicoproteína D. A qPCR foi testada em 25 amostras de cérebro de suíno positivas e 85 amostras negativas para DA no isolamento viral e na soroneutralização. A sensibilidade analítica foi calculada com acréscimo de um isolado brasileiro do SuHV-1 titulado em amostras de cérebro de suíno negativas na soroneutralização e na PCR. A técnica apresentou sensibilidade analítica de 10-0,5 TCID50/50µL. A qPCR foi capaz de distinguir reações inespecíficas devido a dímero de oligonucleotídeos iniciadores ou amplificações, além do alvo designado (evitando, assim, os falso-positivos), e de obter resultados rápidos.

The aim of this study was to validate a low-cost real-time PCR for a quick and sensitive diagnosis of the disease. The fluorofore used was a DNA intercalating agent, one of the cheaper detection systems. Primers amplified a 123 base pairs fragment of the gene coding for glycoprotein D. PCR was tested on 25 samples of pig brain positive for AD and 85 samples negative in viral isolation and serum neutralization. The detection limit was calculated on samples of pig brain contaminated with a Brazilian isolate of SuHV-1. The technique had a detection limit of 10-0,5 TCID50/50µL. PCR was able to distinguish nonspecific reactions due to primer dimers (thus avoiding false positives) and get faster results.

Suid herpesvirus 1 (SuHV-1) is the causative agent of pseudorabies (PR), a disease of great importance due to the huge losses it causes in the swine industry. The aim of this study was to determine a method for genotyping SuHV-1 based on partial sequences of the gene coding for glycoprotein C (gC) and to elucidate the possible reasons for the variability of this region. A total of 109 gCsequences collected from GenBank were divided into five major groups after reconstruction of a phylogenetic tree by Bayesian inference. The analysis showed that a portion of gC (approximately 671 bp) is under selective pressure at various points that coincide with regions of protein disorder. It was also possible to divide SuHV-1 into five genotypes that evolved under different selective pressures. These genotypes are not specific to countries or continents, perhaps due to multiple introduction events related to the importation of swine.

Relata-se a ocorrência de um surto de brucelose em um rebanho de aproximadamente 1000 animais, livre da doença há 18 anos, certificado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento desde 2006. Dois animais reagiram aos testes sorológicos de diagnóstico por ocasião dos procedimentos de recertificação em 2008. Após o sacrifício deles, Brucella abortus, biovariedade 1, amostra não vacinal, foi isolada e identificada por meio de provas bioquímicas e de biologia molecular (PCR AMOS). A origem do agente no rebanho é de difícil determinação. No entanto, a adoção de procedimentos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose permitiu evitar a disseminação da enfermidade. Ocorrências como essas, em que rebanhos livres foram infectados após anos sem a ocorrência de brucelose, nunca haviam sido relatadas no Brasil.

A Brucellosis outbreak is reported in a bovine herd free from the disease for over 18 years, officially free since 2006. One heifer and one cow tested positive in serological tests for the 2008 annual recertification in a herd of almost 1000 animals. Isolation and identification by biochemical tests and molecular biology (AMOS PCR) confirmed the infection by a Brucella abortus biovar 1 field strain. It wasn't possible to find the source of the infection. However, adoption of standard procedures prescribed by the Brazilian National Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication Program hindered the spread of the disease. This is the first report of a Brucella infection in an officially Brucellosis-free bovine herd in Brazil.

Desenvolveu-se uma PCR multiplex (mPCR) para diagnóstico diferencial de encefalite bovina causada por herpesvírus suíno 1 (SuHV-1), herpesvírus bovino 1 (BoHV-1), herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) e herpesvírus ovino 2 (OvHV-2). Os iniciadores foram projetados após alinhamento de sequências disponíveis no banco de genomas (GenBank) e a reação foi padronizada levando-se em consideração a concentração dos reagentes e os tipos diferentes de DNA polimerase. Após determinação da especificidade e sensibilidade, 65 amostras de encéfalo de bovinos com síndrome neurológica foram submetidas à análise. A sensibilidade analítica para detecção de BoHV-1, BoHV-5 e SuHV-1 foi, respectivamente, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL na reação multiplex. Das 65 amostras analisadas, 10 foram positivas para BoHV-5, uma para BoHV-1 e cinco para OvHV-2. A mPCR descrita neste trabalho mostrou-se uma técnica útil para o diagnóstico diferencial de enfermidades relacionadas ao sistema nervoso central de bovinos.

The aim of this study was to develop a multiplex PCR (mPCR) for the differential diagnosis of bovine encephalitis caused by the suid herpesvirus 1 (SuHV-1), bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) and ovine herpesvirus 2 (OvHV -2). The primers were designed after alignment of sequences available in GenBank and the reaction was developed by taking into account the concentration of reagents and different types of DNA polymerase. After determining the specificity and sensitivity to PCR, 65 brain samples from cattle with neurological syndrome were submitted to the reaction. The analytical sensitivity for detection of BoHV-1, BoHV-5 and SuHV-1 was, respectively, 10(1,2) TCID50/50µL, 10(1,0) TCID50/50µL, 10(1,3) TCID50/50µL. Ten samples were positive for BoHV-5, one for BoHV-1, one for SuHV-1 and five for OvHV-2. The mPCR described here is a useful technique for the differential diagnosis of diseases related to the central nervous system of cattle.

Comparou-se a técnica nested PCR (nPCR) com os testes sorológicos IDGA e ELISA para o diagnóstico da anemia infecciosa equina. Amostras do DNA provenientes das células mononucleares do sangue periférico foram submetidas à amplificação do gene gag pela nPCR, que apresentou valores de sensibilidade e especificidade relativas de 90% e 52,9%, respectivamente, em relação à IDGA, e valores de 85,7% e 49%, respectivamente, em relação ao ELISA. Considerando-se os fatores referentes às limitações de cada técnica, pode ser sugerido o uso da nPCR como teste de diagnóstico complementar para AIE em amostras brasileiras.

The nested polymerase chain reaction (nPCR) technique was compared to AGID and ELISA serological tests for the diagnosis of Equine Infectious Anemia. DNA samples from the peripheral blood mononuclear cells were subjected to the amplification of the gag gene by nPCR, which showed relative sensibility and specificity values of 90.0% and 52.9% respectively, compared to the AGID and values of 85.7% and 49.0%, respectively, as compared to ELISA. Considering the factors concerning the limitations of each technique, the use of nPCR can be suggested as a complementary diagnostic test for EIA in Brazilian samples.